原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?:使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng),以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號(hào) |
P-X2272 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來(lái)源 |
胰腺組織 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
呈葡萄樣聚集 單個(gè)腺泡呈球形。 |
產(chǎn)品類(lèi)別 |
豬原代細(xì)胞 |
傳代特性 |
見(jiàn)說(shuō)明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述:
胰腺分為外分泌腺和腺兩部分。其中,外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。
腺泡主要由腺泡細(xì)胞構(gòu)成,與閏管相連,外有基膜,為典型的蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞。
細(xì)胞特性:
1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常胰腺組織。
2) 細(xì)胞鑒定:亞甲藍(lán)染色。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:呈葡萄樣聚集,多數(shù)懸浮,單個(gè)腺泡呈球形。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit placenta mesenchymal stem cells
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;LT001
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Mouse primary coronary artery endothelial
cells
雜交瘤細(xì)胞株;FF/7A8
SK-MEL-1 (人皮膚黑色素瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
人腎小球系膜細(xì)胞
大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞
615小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤瘤株
RWPE-1 (人正常前列腺上皮細(xì)胞)
兔胃黏膜成纖維細(xì)胞 Rabbit primary gastric mucosal fibroblasts
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF
小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件,并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái),然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性,包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng),可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此,傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證,以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究,包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng):需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件,避免細(xì)胞污染;注意細(xì)胞的存活率和純度,避免其他類(lèi)型細(xì)胞的混雜;以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HumanHGVIgGELISAkit
14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框130抗體
小鼠胞內(nèi)氯離子通道蛋白1(CLIC1)elisa生化檢測(cè)試劑盒
DNA補(bǔ)充修復(fù)XPC細(xì)胞蛋白抗體 Anti-XPC
組蛋白H3-K79(mono/di/tri)甲基化檢測(cè)試劑盒
神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體 Anti-NECAB1/EF-CBP1
絲氨酸蛋白酶14/膜型絲氨酸蛋白酶1抗體 Anti-ST14/MTSP1
環(huán)指蛋白213 Anti-RNF213
人庚型肝炎病毒(HGV)抗體(IgG)elisa生化檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞周期蛋白SG2N抗體 Anti-Striatin 3/SG2NA
CRP ELISA Kit
C14orf130
大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa生化檢測(cè)試劑盒
二胺氧化酶DAO測(cè)試盒生化分析儀 25ml /
80T 紫外比色法
鋅指蛋白575抗體 Anti-ZNF575
MAGEA3
抑癌基因Rbms3抗體 Anti-Rbms3
黑色素瘤相關(guān)抗原3抗體
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白抗體 Anti-NAT8L
寡核苷酸探針同位素法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒
豬瘟抗體 Anti-Classical swine fever virus, CSFV
Calpain 12
庚型肝炎多聚蛋白抗體 Anti-Polyprotein(Hepatitis G Virus)
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞;A-9
轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子SP1抗體 Anti-TSFP1/SP1
ECM29
PARL
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗羊IgG H&L
骨骼肌細(xì)胞線(xiàn)粒體膜蛋白PARL抗體
鈣激活蛋白酶12抗體
Rabbit Anti-Goat IgG H&L / HRP
豬胰腺腺泡上皮細(xì)胞ECM29蛋白抗體
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?:
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
二、?無(wú)菌操作?:整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?:跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài),適時(shí)進(jìn)行傳代,避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?:對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞,可以進(jìn)行冷凍保存,并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。