原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
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產(chǎn)品貨號(hào) |
P-X2287 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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組織來(lái)源 |
鼻腔粘膜組織 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
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細(xì)胞形態(tài) |
鋪路石狀細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
產(chǎn)品類(lèi)別 |
豬原代細(xì)胞 |
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傳代特性 |
見(jiàn)說(shuō)明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述：
鼻腔粘膜是覆蓋在動(dòng)物體內(nèi)呼吸器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu)，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。鼻腔粘膜覆蓋于鼻腔表面，粘膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動(dòng)?；讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂，以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的，有利于復(fù)層扁平上皮的營(yíng)養(yǎng)
細(xì)胞特性：
1） 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常鼻腔粘膜組織。
2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或細(xì)胞角蛋白-19（CK-19）熒光染色為陽(yáng)性。經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品：
兔胃黏膜成纖維細(xì)胞 Rabbit primary gastric mucosal fibroblasts
雜交瘤細(xì)胞；6H7
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 Mouse primary bone marrow mesenchymal stem
cells;mbmsc
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；XYCDY-1BV-1E6
SF17 (人腦瘤細(xì)胞)
人食管鱗癌細(xì)胞
人心肌細(xì)胞
615小鼠滑膜肉瘤瘤株
SBC-2（人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）
兔纖維環(huán)細(xì)胞 Rabbit annulus fibrosus cell
小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)；R1
兔晶體上皮細(xì)胞永生系；N/N1003A（RLE）
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類(lèi)型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
EPS8L1
豚鼠白介素2(IL-2)elisa生化檢測(cè)試劑盒
humanβ2-MGELISAKit
人輔酶Q10(CoQ10)elisa檢測(cè)試劑盒
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa生化檢測(cè)試劑盒
體液基質(zhì)金屬（MMP-8）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 Anti-SATB1
大鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ2(GSTθ2)elisa檢測(cè)試劑盒
EPS8L1蛋白抗體
魚(yú)白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒
Rabbit Anti-Chicken IgM / PE-Cy3
IL-2ELISAKit
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgM
豬白介素13(IL-13)elisa生化檢測(cè)試劑盒
睪丸特異定蛋白質(zhì)編碼Y1抗體 Anti-TSPY1
CaMKK ELISA Kit
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 Anti-Neurotrophin 3/NT-3 proprotein
大鼠鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶激酶(CaMKK)elisa生化檢測(cè)試劑盒
維甲酸相關(guān)孤兒受體α抗體 Anti-ROR1/ROR alpha
IL-13ELISAKit
大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)elisa檢測(cè)試劑盒
Casp4ELISAKit
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠T細(xì)胞；CTLL-2 [CTLL2]
細(xì)胞磷酸化酶活性染色試劑盒
EXTL2
MDA ELISA kit
MSL1蛋白抗體
倉(cāng)鼠丙二醛(MDA)elisa生化檢測(cè)試劑盒
人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)elisa生化檢測(cè)試劑盒
MSL1
豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞外生性骨疣樣蛋白2抗體
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。