原代細胞實驗步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細胞分離的方法各實驗室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質酶等）。
5．若進行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉倒置后在37℃培養(yǎng)箱內放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內繼續(xù)進行培養(yǎng)。
本產品于科學研究實驗使用、不得用于其它。
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組織來源 |
肝組織 |
貨號 |
P-X2315 |
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產品規(guī)格 |
5×105 |
生長特性 |
貼壁 |
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產品類別 |
鴨原代細胞 |
細胞形態(tài) |
長梭形 不規(guī)則細胞 |
細胞詳述：
肝臟是人體中大的腺體，也是大的實質性臟器。肝間質細胞屬于成體干細胞，已有研究發(fā)現它可以向骨、軟骨、肌腱、脂肪、等分化。成體干細胞的向肌細胞的分化使得很多肌肉退行性、遺傳性的多了一種更佳的選擇。
細胞特性：
1） 組織來源于實驗動物的正常肝組織。
2) 細胞鑒定：CD44熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式：長梭形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
6)
推薦培養(yǎng)基：
細胞特性
1) 組織來源于實驗動物的正常肝組織。
2) 細胞鑒定：CD44熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式：長梭形，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
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注意事項：
1.收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。