操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主研發(fā),技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-01611210-100管/96樣 |
商品介紹:
測定意義
GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。
測定原理
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過340nm下測定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Antibiotic Solution 2(100X) 支原體去除試劑2(100X) 4×1.5ml
YM-58483 CRAC channels抑制劑(YM-58483) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
MK2-IN-1 MK2激酶抑制劑(MK2-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
阿拉伯膠水溶液(35%) 100ml
Methenolone acetate 下丘腦-垂體-性腺通路抑制劑 1mL(10mM)|1g
Odanacatib cathepsin K抑制劑(Odanacatib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Avibactam sodium β-lactamase抑制劑(Avibactam sodium) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Leukadherin-1 CD11b/CD18激動(dòng)劑(Leukadherin-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型) 100ml|500ml
鉀礬明膠包被液 100ml
AR-C155858 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MCTs)抑制劑 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
IFN alpha-IFNAR-IN-1 IFN alpha和其受體IFNAR相互作用抑制劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Ibuprofen COX-1和COX-2抑制劑(Ibuprofen) 1mL(10mM)|1g|5g
Treosulfan DNA烷基化劑(Treosulfan) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)生化試劑盒(微量法)小鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Caco-2,結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-N87 [N87]胃癌細(xì)胞
雞**球蛋白Y(IgY)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 MGC80-3(MGC-803)胃癌細(xì)胞
人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EC109,食管癌細(xì)胞
人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HGC-27胃癌細(xì)胞
人葉酸(FA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AGS胃腺癌細(xì)胞
小鼠促黃體**(LH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞
鴨子β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 THP-1單核白血病細(xì)胞
大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HuH-7肝癌細(xì)胞
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MiaPaCa-2, 胰腺癌細(xì)胞
牛C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RBE, 肝膽管癌細(xì)胞