ELISA包被細(xì)胞過(guò)程：

1. 在 96 孔培養(yǎng)板上接種細(xì)胞數(shù)為 1 x 104 cells/well ，37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2. 第2天用 PBS 洗滌培養(yǎng)板 2-3 次。

3. 加入 125 μl/well 10% Formalin（1:10 稀釋） , 室溫下固定 15 min。

4. 用 ddH2O 洗滌培養(yǎng)板 3 次，并晾干，儲(chǔ)藏在 2-8oC 備用。

5. 用 PBST 洗滌 3 次，每孔加入 150 μl 1％ BSA 37 oC 封閉 1 小時(shí)。

6. PBST 洗滌 3 次后，每孔加入 100 μl 不同倍比稀釋度的血清，并加入對(duì)照樣

品， 37 oC 孵育 2 小時(shí)。

7. PBST 洗滌 5 次后， 加入 100 μl 稀釋后的 HRP 標(biāo)記的二抗,37 oC 孵育 1 小時(shí)。

8. PBST 洗滌 5 次后，顯色劑顯色 20min 后，酶標(biāo)儀上讀取 A405 吸收值。

50mM 的碳酸鹽包被緩沖液： 0.05mol/L pH9.6 碳酸緩沖液,4℃,保存, Na2CO3 0.15 克, NaHCO3 0.293 克,蒸餾水稀釋至 100 ml。