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ELISA檢測技術簡述

日期:2025-04-20 02:43
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摘要: ELISA技術可用于測定抗原,也可用于測定抗體。 ELISA方法中有三個必要的試劑: (1) 固相的抗原或抗體,即"免yi 吸附劑"(immunosorbent); (2) 酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate); (3) 酶反應的底物。 一般可將ELISA分為以下幾種類型,實驗先需要根據(jù)自己的待檢物來確定試劑盒類型。 1) 、雙抗體夾心法:針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標檢測抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原如血漿中的細胞因子,不適用于測定半抗原及小...

ELISA技術可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

ELISA方法中有三個必要的試劑:

(1) 固相的抗原或抗體,即"免yi 吸附劑"(immunosorbent);

(2) 酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate);

(3) 酶反應的底物。

一般可將ELISA分為以下幾種類型,實驗先需要根據(jù)自己的待檢物來確定試劑盒類型。

1) 、雙抗體夾心法:針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標檢測抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原如血漿中的細胞因子,不適用于測定半抗原及小分子單價抗原。同理,也有雙抗原夾心法測抗體。

2) 、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一抗,即可測定抗原總量。此法操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。

3) 、間接法:間接法是檢測抗體常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體(抗人免yi 球蛋白抗體)來檢測與固相抗原結合的待檢抗體。

4) 、競爭法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。當抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體