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小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作步驟

日期:2025-01-22 01:08
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摘要: 小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作步驟: 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法(eg:ELISA雙抗體夾心法測定培養(yǎng)上清中IFN-γ水平) 1、包被:取空白 96 孔板,按 COA 用 PBS 稀釋捕獲抗體,每孔 100μl捕獲抗體工作液,室溫過夜; 2、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次; 3、封閉:加入封閉液 200 μL/孔封閉 ELISA 板,室溫孵育 1h; 4、洗板:甩去板中的封閉液體,加入洗液 350μL/孔,洗板 3 次;...

小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法操作步驟:

用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法(eg:ELISA雙抗體夾心法測定培養(yǎng)上清中IFN-γ水平)







1、包被:取空白 96 孔板,按 COA 用 PBS 稀釋捕獲抗體,每孔 100μl捕獲抗體工作液,室溫過夜;


2、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;


3、封閉:加入封閉液 200 μL/孔封閉 ELISA 板,室溫孵育 1h;


4、洗板:甩去板中的封閉液體,加入洗液 350μL/孔,洗板 3 次;


6、加樣:取出包被封閉好的 96 孔板,分別加入 100μl標(biāo)準(zhǔn)品或稀釋好的樣品,標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔,室溫孵育 2h;


7、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;


8、加酶標(biāo)抗體:按 COA 用稀釋液稀釋檢測抗體,每孔 100μl檢測抗體工作液,室溫孵育 2h;


9、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;


10、加入底物:每孔 100μl顯色液,室溫避光孵育 20min,連續(xù)觀察顏色變化;


11、加終止液:每孔 50μl終止液,輕柔混勻;


12、讀板:檢測根據(jù)酶標(biāo)儀器操作方法,上機(jī)檢測 OD值,通過計算獲得所測物質(zhì)的濃度。