新聞詳情
細胞收集具體流程
日期：2025-04-18 12:27
瀏覽次數(shù)：46
摘要：
細胞收集具體流程：
1、以T25瓶為例，在超凈工作臺中，先將培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基輕輕吸出，用預(yù)熱至 37℃的 PBS 緩沖液緩慢沖洗細胞 2 - 3 次，每次沖洗時 PBS 緩沖液的用量以能覆蓋細胞單層為宜，一般為 5 - 10 ml。沖洗的目的是去除殘留的培養(yǎng)基和血清，減少其對后續(xù)凍存過程的影響。
2、然后加入適量的胰酶-EDTA 溶液（根據(jù)細胞類型和培養(yǎng)瓶大小確定用量，一般 T25培養(yǎng)瓶加入1 ml）。
3、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 - 5 分鐘。在消化過程中，需密切觀察細...
細胞收集具體流程：
1、以T25瓶為例，在超凈工作臺中，先將培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)基輕輕吸出，用預(yù)熱至 37℃的 PBS 緩沖液緩慢沖洗細胞 2 - 3 次，每次沖洗時 PBS 緩沖液的用量以能覆蓋細胞單層為宜，一般為 5 - 10 ml。沖洗的目的是去除殘留的培養(yǎng)基和血清，減少其對后續(xù)凍存過程的影響。
2、然后加入適量的胰酶-EDTA 溶液（根據(jù)細胞類型和培養(yǎng)瓶大小確定用量，一般 T25培養(yǎng)瓶加入1 ml）。
3、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 - 5 分鐘。在消化過程中，需密切觀察細胞形態(tài)變化。當(dāng)細胞開始變圓、收縮并逐漸從培養(yǎng)容器底部脫離時，用手輕輕拍打培養(yǎng)容器的側(cè)壁，幫助細胞完全脫落。不同細胞類型的消化時間會有所不同，例如，一些上皮細胞可能需要3-5分鐘左右，而一些成纖維細胞可能需要2-4分鐘左右。
4、用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞充分脫離培養(yǎng)瓶底部并分散均勻，避免產(chǎn)生過多氣泡。將細胞懸液轉(zhuǎn)移至15 ml離心管中。