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PCR拖帶產(chǎn)生探秘
日期：2025-01-23 03:45
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摘要：
有可能是你的膠點樣孔不整齊，就是你做膠的時候膠沒有凝固好，你可以試試重新做塊膠。
PCR拖帶產(chǎn)生原因有很多：
1、退火溫度較低，可以提高2到3度；
2、Mg離子濃度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知樓主用的多少；
3、模板濃度較高或者含有其他PCR抑制劑，建議稀釋下模板；
4、延伸時間一般1kb/min，時間太短可能會延伸不完全；
5、循環(huán)數(shù)太高也可能引起拖帶，考慮平臺期，30－35循環(huán)應(yīng)該足夠了。
有可能是你的膠點樣孔不整齊，就是你做膠的時候膠沒有凝固好，你可以試試重新做塊膠。
PCR拖帶產(chǎn)生原因有很多：
1、退火溫度較低，可以提高2到3度；
2、Mg離子濃度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知樓主用的多少；
3、模板濃度較高或者含有其他PCR抑制劑，建議稀釋下模板；
4、延伸時間一般1kb/min，時間太短可能會延伸不完全；
5、循環(huán)數(shù)太高也可能引起拖帶，考慮平臺期，30－35循環(huán)應(yīng)該足夠了。