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PCR出現(xiàn)擴增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對策
日期:2025-04-20 04:47
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摘要:
PCR出現(xiàn)擴增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對策:
1、引物用量偏大,引物的特異性不高。應調(diào)換引物或降低引物的使用量。
2、循環(huán)的次數(shù)過多。適當增加模板的量,減少循環(huán)次數(shù)。
3、酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好,應降低酶量或調(diào)換另一來源的酶。
4、退火溫度偏低,退火及延伸時間偏長。應提高退火溫度,減少變性與延伸時間,也可采用二種溫度的PCR擴增。
5、樣品處理不當。
6、Mg2+濃度偏高,因適當調(diào)整Mg2+使用濃度。
7、若為PCR試劑盒,也可能時試劑盒本身質(zhì)量有問題...
PCR出現(xiàn)擴增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶問題對策:
1、引物用量偏大,引物的特異性不高。應調(diào)換引物或降低引物的使用量。
2、循環(huán)的次數(shù)過多。適當增加模板的量,減少循環(huán)次數(shù)。
3、酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好,應降低酶量或調(diào)換另一來源的酶。
4、退火溫度偏低,退火及延伸時間偏長。應提高退火溫度,減少變性與延伸時間,也可采用二種溫度的PCR擴增。
5、樣品處理不當。
6、Mg2+濃度偏高,因適當調(diào)整Mg2+使用濃度。
7、若為PCR試劑盒,也可能時試劑盒本身質(zhì)量有問題。