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分光光度法的定量方法
日期:2025-04-20 11:14
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摘要:
分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。
利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定,主要有以下幾種方法:1、標(biāo)準(zhǔn)管法
將待測(cè)溶液與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同條件下分別測(cè)定A值,然后按下式求得待測(cè)溶液中物質(zhì)的含量。
CT=(AT/AS)*CS
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
先配制一系列濃度由小到大的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別測(cè)定出它們的A值,以A值為橫坐標(biāo),濃度為縱坐標(biāo),作標(biāo)準(zhǔn)曲線(A~c工作曲線),可以求出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程。在測(cè)定待測(cè)溶液時(shí),操作條件應(yīng)與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)相同,以待測(cè)液的A值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出(得到)該樣品的相應(yīng)濃度。
3、吸光系數(shù)法
當(dāng)某物質(zhì)溶液的濃度為1mol/L,厚度為1cm時(shí),溶液對(duì)某波長(zhǎng)的吸光度稱為該物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù),以ε表示。ε值可通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)得,也可由手冊(cè)中查出。例如亞鐵氮二雜菲配合物的ε值 等于11000 L/cm·mol
已知某物質(zhì)ε值,只要測(cè)出其A值再根據(jù)下式便可求得樣品的濃度:c=A/ε。
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