商品介紹:
測(cè)定意義:
GCL 是 GSH 合成的限速酶,GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長(zhǎng)因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。
測(cè)定原理:
在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷分子,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。
自備儀器和用品:
冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
γ谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-0161135-100管/96樣 |
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Desidustat HIF hydroxylase抑制劑(Desidustat) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
RU-SKI 43 hydrochloride Hhat小分子抑制劑(RU-SKI 43 hydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
土壤亞硝酸還原酶(S-NiR)測(cè)試盒(微量法) 100管/48樣
改良Bielschowsky神經(jīng)染色液 5×50ml
GNE-617 hydrochloride NAMPT抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
NO含量測(cè)試盒(可見(jiàn)分光光度法) 50管/24樣
尿酮體定性檢測(cè)試劑盒(酮粉劑法) 100g
KR-33493 FAF1抑制劑(KR-33493) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Nav1.7 inhibitor Nav1.7抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit 染色質(zhì)**沉淀檢測(cè)試劑盒(ChIP檢測(cè)試劑盒) 22次
Alexamorelin GHS抑制劑(Alexamorelin) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
植物過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒(愈創(chuàng)木酚比色法) 50T
BI-9564 BRD9BD抑制劑(BI-9564) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Ca++Mg++——ATP酶測(cè)試盒(可見(jiàn)分光光度法) 50管/24樣
γ谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)生化試劑盒(微量法)96T/48T試劑盒組裝/原裝 C-型凝集素域家族2成員C(CLEC2C)重組蛋白Recombinant C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Dermokine蛋白(DMKN)重組蛋白Recombinant Dermokine (DMKN)
人白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Dickkopf相關(guān)蛋白2(DKK2)重組蛋白Recombinant Dickkopf Related Protein 2 (DKK2)
人抗脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)重組蛋白Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5)
人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EGF樣域蛋白6(EGFL6)重組蛋白Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 6 (EGFL6)
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)
大鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)
猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)重組蛋白Recombinant FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)
人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)重組蛋白Recombinant GATA Binding Protein 4 (GATA4)
人半糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)重組蛋白Recombinant GATA Binding Protein 3 (GATA3)